猪带绦虫TSOL18-SP蛋白的原核表达及其多抗的制备

文献类型: 中文期刊

第一作者: 陈晓宇

作者: 陈晓宇;丁军涛;骆学农;王颖;刘斌;张少华;郑亚东;景志忠;才学鹏

作者机构: 甘肃农业大学动物医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所

关键词: 猪带绦虫六钩蚴;TSOL18;基因改造;原核表达;高免血清

期刊名称: 甘肃农业大学学报

ISSN: 1003-4315

年卷期: 2008 年 43 卷 06 期

页码: 14-18

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 对TSOL18基因中4个碱基进行定点突变,并截去N端16个氨基酸的信号肽,构建pGEX-TSOL18-SP原核表达载体,IPTG诱导表达后进行产物的SDS-PAGE及Western blot分析;用改造的纯化蛋白免疫家兔后采集血清,经琼脂双扩散试验检测血清抗体效价.结果表明:TSOL18基因改造后长度为345 bp,共有7个碱基发生突变,但氨基酸序列没有改变,与GenBank收录的TSOL18基因核苷酸序列相似性为97%,氨基酸序列相似性为100%.SDS-PAGE及Western blot分析表明:改造的重组菌诱导后可高效表达可溶性目的蛋白,且TSOL18-SP分子量约为38.7 kD,与猪带绦虫六钩蚴阳性血清反应性强;琼脂双扩散法测定免疫兔血清抗体效价为1∶32~64,说明表达的TSOL18-SP蛋白具有较好的免疫原性.

分类号: S852.734

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