坏死梭杆菌白细胞毒素基因BSBSE片段的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈立志

作者： 陈立志;冯书章;张秀华;王克坚;刘晓颖

作者机构：

关键词： 坏死梭杆菌;白细胞毒素;BSBSE;克隆;表达

期刊名称： 吉林农业大学学报

ISSN： 1000-5684

年卷期： 2007 年 29 卷 05 期

页码： 100-103

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以牛源坏死梭杆菌FNn株为试材,根据GenBank上已发表的坏死梭杆菌AF312861标准菌株的lktA序列设计1对引物,利用PCR技术扩增出1 131 bp的坏死梭杆菌白细胞毒素BSBSE基因。将PCR产物插入pGEM-T Easy vector中,经双酶切鉴定正确后进行序列测定。分析表明该BSBSE序列与GenBank上已发表的坏死梭杆菌AF312861标准菌株的lktA序列的核苷酸同源性为99%,推导出的氨基酸序列同源性为98%。为研究BSBSE的免疫原性,构建了原核表达载体pMAL-p2X-BSBSE,用IPTG诱导在大肠杆菌中表达。结果表明,BSBSE基因在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达,融合蛋白分子量约为84.5×103,其中41.5×103为BS-BSE基因表达的蛋白质,43.0×103为MBP融合标签,Western-blotting检测表明该表达产物有免疫原性。

分类号： S852.61

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