猪链球菌2型mrp基因ORF1序列的克隆及原核表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 孙瑜隆

作者: 孙瑜隆;柳纪省;魏虎来;李学瑞

作者机构:

关键词: 猪链球菌2型;溶菌酶释放蛋白;融合表达

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2007 年 37 卷 08 期

页码: 675-678

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因(mrp)的序列,设计并合成了1对特异性引物,以青海株的基因组DNA为模板扩增了mrp基因ORF1序列。将PCR产物进行了T/A克隆,转化大肠杆菌,鉴定成功获得目的片段后,将其定向亚克隆到pET-28a(+)中,构建了原核表达质粒pET-28a-mrp,并将其转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带(27.0 ku)。Western-blot分析表明,该融合蛋白具有MRP的抗原表位。研究结果为今后开展该病的免疫学研究奠定了一定基础。

分类号: S852.61

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