猪IFN-α14的表达、纯化及抗病毒活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 方剑玉

作者： 方剑玉;白杰;席燕燕;黄慧敏;徐引弟;王改利;张青娴;徐彬;李绍钰;王克领

作者机构：

关键词： 猪IFN-α14;抗病毒活性;大肠杆菌表达;猪流行性腹泻病毒

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2022 年 42 卷 010 期

页码： 1994-2000

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 干扰素(interferon,IFN)是一类具有抗病毒和免疫调节功能的细胞因子,目前已经应用于多种人和动物病毒病的预防和治疗.不同猪干扰素亚型的抗病毒活性差异较大,为了解猪IFN-α14的抗病毒活性,将猪IFN-α14基因序列进行分析,去除信号肽、优化密码子,并采用基因合成的方法 合成了猪IFN-a14亚型基因,将其克隆入pCSMH原核表达载体,优化诱导条件,利用Ni琼脂糖凝胶纯化柱进行亲和层析,获得高纯度的重组猪IFN-α14蛋白,Western blot检测证明重组蛋白具有较好的特异性.用不同浓度的重组猪IFN-α14处理Vero细胞后,接种1 000 TCID50猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),24 h收集细胞和上清,通过荧光定量检测细胞内病毒的RNA水平,同时测定细胞上清中病毒的TCID50.猪IFN-α14蛋白被成功表达并纯化,证明了10μg/L的重组猪IFN-α14干扰素能够显著抑制PEDV的复制.与本实验室前期表达纯化的猪IFN-α2、8相比,猪IFN-α14抑制PEDV复制的活性显著提高,为新型抗病毒药物开发提供了重要的依据和数据支持.

分类号： S852.4

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