乳酸克鲁维斯酵母乳糖酶基因的克隆及原核表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘爱兵

作者: 刘爱兵;张伟;李名扬

作者机构:

关键词: 乳糖酶基因;原核表达;酶活力

期刊名称: 西南农业大学学报(自然科学版)

ISSN: 1000-2642

年卷期: 2004 年 26 卷 05 期

页码: 636-639

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 从乳酸克鲁维斯酵母(Kluyveromyceslactis)菌株k538中克隆获得乳糖酶基因klac,并将其插入到表达载体pET-30a(+)上构建重组表达质粒pETlac4。将pETlac4电击转化到大肠杆菌BL21中,分别研究了阳性转化子在28℃,37℃下经IPTG诱导3h后的蛋白表达情况。表达产物的SDS-PAGE分析和酶活性测定表明,klac基因在大肠杆菌中获得活性表达,其中低温条件28℃下的表达水平明显高于37℃,28℃诱导的细胞经超声波破碎所测酶活力为0.475U/mL,37℃仅为0.134U/mL。

分类号: Q789

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