文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘玉芬
作者: 刘玉芬;刘胜旺;荣骏弓;孔宪刚;刘宝全
作者机构:
关键词: 传染性支气管炎病毒
期刊名称: 中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2004 年 24 卷 2 期
页码: 122-125
收录情况: CSCD
摘要: 参照已发表的鸡传染性支气管炎病毒(infectlous bronchItis virus,IBV)基因序列,设计合成了1对引物,经RT- PCR扩增得到了IBV国内分离株D97l约1.3 kb的片段,其中包含3a、3b、E及M蛋白基因的完整0RF,并将该片段进行了克隆和序列测定。与国内外部分IBV毒株序列比较表明:D97l 3a基因与cU-T2、D1466、DE072、M41、GA/99和UK/66的3a基因核苷酸序列同源性在83%~89%之间,氨基酸序列同源性为77%~91%,其中与CU-T2毒株的同源性最低(分别为83%和77%);3b基因与上述毒株的对应核苷酸序列同源性在85%~95%之间,氨基酸序列同源性为72%~96%,与CU-T2的同源性最高(分别为95%和96%);E蛋白基因与CU-T2、Dl 466、DE072、M41、Ark99、 H52、Gray、GA/99和UK/66的核苷酸序列同源性在8l%~86%之间,氨基酸序列同源性为74%~80%。不同毒株推导的E蛋白C末端表现不同特征,其中D97lE蛋白C末端比CU~T2的对应区多9个氨基酸残基,而比本试验选用的其他参考毒株的相应区域短5~7个氨基酸残基。M基因与cU~T2、DE072、Gray、M41、H]20、H52、sD/97/02、LX4及 D4l的M基因核苷酸序列同源性在86%~91%之间,氨基酸序列同源性为85%~95%,其中与SD/97/02的同源性最高(分别为9l%和95%)。对M蛋白的3个功能区进行序列比较发现,其N端第1~19位与SD/97/02的同源性最高,达90%,与cU-T2的同源性为80%,而与其他毒株同源性均低于6l%;N端第20~1()()位含有3个跨膜疏水区, D971与其他参考毒株比较,该部位第20~67位相对保守,其中与sI)/97/()2的同源性为Ioo%,与其他毒株的同源性在97%以下;在推测的与核表壳连接的c端,D97l与sD/97/02在第10l~182位同源性为100%,与疫苗株H52和 H120及国内分离株Lx4和D4l的同源性为97%,而与本试验所选的国外参考毒株同源性在96%以下;在C端第184~219位D971与H52的同源性为100%,与H120和sI)/97/02的同源性为97%,与其他毒株的同源性也在96%以下,而且在C末端第220~222及224位与上述国内外参考毒株均不同,国内外各毒株在该4个位点氨基酸为丙氨酸、苏氨酸、甘氨酸和丝氨酸,而D971M蛋白的该区域氨基酸突变为丝氨酸、丙氨酸、缬氨酸和甘氨酸,该突变是否与 D971的生物学特性尤其是组织嗜性的变化相关还有待于进一步研究。以上结果表明,D97l与sD/97/02亲缘关系较其他毒株为近,但其遗传衍化又与国内使用的疫苗株H52和H120具有一定的联系。从其mRNA。和mRNA4 cDNA的序列分析来看,D971又具有独特的分子特征。
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