非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白的原核表达及其免疫特性研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 谢振华
作者: 谢振华;刘英楠;张萌;敖清莹;吕璐;于婉琪;扈荣良;邬静;陈鸿军
作者机构:
关键词: 非洲猪瘟病毒;C-type lectin蛋白;抗体;免疫特性
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2021 年 001 期
页码: 37-44
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了制备非洲猪瘟病毒(ASFV)SY18毒株的C-type lectin蛋白多抗,以基因序列优化的真核质粒为模板,扩增EP153R基因,构建原核表达重组质粒pET-32a-EP153R。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,利用IPTG诱导宿主菌表达后,纯化C-type lectin重组蛋白。用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备C-type lectin蛋白多抗,利用Western-blot和间接免疫荧光技术鉴定该抗体的反应性和特异性。结果表明,原核表达重组蛋白C-type lectin经IPTG诱导表达成功,大小约为38 ku,其主要以包涵体形式表达,且能与His标签单抗发生反应,C-type lectin蛋白多抗可特异性识别非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白。本研究为非洲猪瘟血清学检测方法的建立及C-type lectin蛋白生物学功能的探究奠定了基础。
分类号: S852.651
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