猪δ冠状病毒M蛋白的原核表达、纯化与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 魏姗

作者： 魏姗;石达;陈建飞;冯力;孙东波

作者机构：

关键词： 猪δ冠状病毒;M蛋白;基因表达;蛋白纯化;免疫印迹

期刊名称： 黑龙江八一农垦大学学报

ISSN： 1002-2090

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 41-45

摘要： δ冠状病毒是一种可以感染哺乳动物和鸟类的新型冠状病毒,其中,猪δ冠状病毒可以引发仔猪的呕吐、腹泻、脱水,甚至死亡,给养猪业造成了巨大的损失。为了获得猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)M基因重组蛋白,试验克隆了PDCoV NH毒株的M基因,并连接至pET-32a原核表达载体,构建了PDCoV M基因重组质粒(pET-32a-M),将pET-32aM重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)后,利用1 mM浓度IPTG进行诱导表达,进一步对表达的PDCoV重组M蛋白进行纯化与鉴定。结果显示,以PDCoV NH毒株病毒RNA为模板,通过RT-PCR扩增出约654 bp的M基因,与预期大小相符;SDSPAGE电泳结果显示,PDCoV M基因在大肠杆菌BL21(DE3)中成功获得表达,表达的重组M蛋白大小为42 kD,与预期大小相符;通过western blot进行鉴定,结果显示,纯化的重组M蛋白能与PDCoV阳性血清发生反应,具有良好的抗原性。研究成功表达了PDCoV M蛋白,为PDCoV的进一步研究奠定了基础。

分类号： S852.651

  • 相关文献

[1]猪流行性腹泻病毒CH/S株M蛋白全长的原核表达及其反应原性分析. 张志榜,陈建飞,时洪艳,陈小金,冯力. 2011

[2]弓形虫表面抗原SAG1截短型片段在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化. 安立刚,蒋蔚,王权,陈永军,龚国华,周锦萍,邢小勇,孙泉云,丁铲. 2009

[3]扬奇青霉α-半乳糖苷酶agl1基因在大肠杆菌中的表达与纯化研究. 张波,陈轶群,李志民,李一航,曹云鹤. 2009

[4]猪δ冠状病毒致病机制研究进展. 江珊,李秀丽,张莉,王利丽,李富强,路超,郑丽,鄢明华. 2021

[5]枯草芽孢杆菌4种环脂肽抗猪δ冠状病毒的研究. 朱桃,张双玉,张路阳,钟纯燕,陈悦雯,李基棕,李彬,罗楚平. 2024

[6]四种常见猪肠道病毒多重RT-PCR检测方法的建立及临床应用. 辛忠昊,焦安琪,朱彤,刘丽萍,黄兵,于江,郭效珍,吴家强. 2022

[7]厦门地区规模猪场八种致猪腹泻病病毒感染调查. 赵冉,蔡振鸿,陈琼,李传勇,李兆龙,彭小莉,陈永锋,连玉华,周振宇,彭清渊. 2023

[8]稳定表达猪δ冠状病毒S1蛋白CHO细胞系的构建与鉴定. 孙雪珂,丁培阳,王思桥,刘思源,李明慧,常泽杰,陈艺兰,李瑞琪,张改平. 2023

[9]猪δ冠状病毒RBD蛋白在昆虫细胞中的表达. 张爽,郝鹏飞,伊立超,姜宇航,郝嘉翼,李乐天,时小双,徐鹏,金宁一,贾立军,李昌. 2021

[10]密码子优化提高PRRSV GP5/M双基因在真核细胞中的同步表达. 张永红,徐建,张建楼,霍珊珊,王利月. 2015

[11]猪流行性腹泻病毒(PEDV)DR13株N蛋白和M蛋白的分离纯化. 谢春芳,胡忠俊,于瑞嵩,董世娟,陈冰清,李震. 2021

[12]截短的猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的原核表达. 戚亭,崔尚金,张超范. 2008

[13]猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白B细胞抗原表位的鉴定. 周艳君,田志军,刘金霞,安同庆,彭金美,薛强,蔡雪辉,于海,李国新,刘娣,童光志,王云峰,王玫. 2009

[14]截短的猪生殖与呼吸综合征病毒M基因的原核表达. 戚亭,崔尚金,张超范. 2008

[15]M蛋白携带TC标签的重组新城疫病毒的构建及生物学特性鉴定. 范振,孙军峰,赵冉,韩宗玺,刘胜旺. 2019

[16]植物乳杆菌表达重组新冠病毒M抗原表位及免疫原性分析. 邓安琦,叶丹妮,艾雪言,唐秀兰,陈文聪,陈嘉豪,郝嘉翼,邓玲聪,李昌,陈永福,金俊杰,王茂鹏. 2024

[17]稳定表达PRRSV M蛋白的MARC-145ORF6细胞系的构建及其对PRRSV增殖的影响. 荆扬,王玉淼,李洋,常辉,马志倩,李志伟,肖书奇. 2024

[18]NDV感染促进hnRNPA1进入细胞质帮助病毒增殖. 姜维雨,丁铲,廖瑛. 2021

[19]猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的表达及其单克隆抗体的制备. 周艳君,安同庆,刘金霞,田志军,彭金美,华荣虹,仇华吉,王云峰,王玫,童光志. 2006

[20]猪流行性腹泻病毒M蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 张志榜,陈建飞,时洪艳,杨斌,石达,陈小金,冯力. 2011

作者其他论文 更多>>

微信小程序