新型鸭呼肠孤病毒群特异性抗原蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 罗丹

作者： 罗丹;杨伏春;高立;李凯;祁小乐;高玉龙;刘长军;张艳萍;崔红玉;潘青;王笑梅

作者机构：

关键词： 新型鸭呼肠孤病毒;群特异性抗原蛋白;σB;多克隆抗体

期刊名称： 中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2020 年 42 卷 011 期

页码： 27-32

收录情况： 北大核心

摘要： 为制备新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)群特异性抗原σB的多克隆抗体,研究采用RT-PCR方法扩增NDRV-SD 19/6201株σB基因编码序列,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21 (DE3)中进行诱导表达.SDS-PAGE和Western blot鉴定结果显示,NDRV群特异性抗原σB获得高效表达,重组蛋白分子量约55 ku,该重组蛋白具有良好的免疫活性,能与His-标签抗体及NDRV阳性血清发生特异性结合反应.以纯化的重组蛋白免疫新西兰兔,获得高效价多克隆抗体,效价1∶12 800以上;间接免疫荧光试验表明,多克隆抗体能特异性识别多株NDRV毒株,具有较好的免疫反应活性.研究为建立NDRV血清学诊断方法提供了材料,同时为探究σB蛋白生物学功能奠定了基础.

分类号： S855.3

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