碱性α-淀粉酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究

文献类型: 中文期刊

第一作者: 金辉

作者: 廖思明;王青艳;刘筱梦;黄日波

作者机构:

关键词: 碱性α-淀粉酶;巨大芽孢杆菌;芽孢杆菌表达系统;基因表达;酶学性质

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2011 年 0 卷 11 期

页码: 154-159

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 将已克隆的碱性α-淀粉酶基因信号肽编码序列去除,用PCR的方法加入酶切位点,然后与表达载体pHIS1525连接转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5α-pHIS1525-JH,并提取质粒进一步转化巨大芽孢杆菌YYBm1原生质体,获得基因工程菌YYBm1-pHIS1525-JH。SDS-PAGE分析表明该基因在巨大芽孢杆菌中得到了有效表达。酶学性质研究表明,该酶的最适温度与pH值分别为60℃与pH8.5,在pH7.0-10.5之间具有较好的稳定性,Km值为1.94 mg/mL,酶活力可达2 516.5 U。

分类号: Q78

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