嵌合口蹄疫病毒抗原表位的重组塞内卡病毒A的构建及其鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋高媛

作者： 宋高媛;杨帆;郝荣增;李郁;郑海学

作者机构：

关键词： 塞内卡病毒A;口蹄疫病毒;抗原表位;嵌合病毒

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2020 年 03 期

页码： 565-573

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 塞内卡病毒A(SVA)与口蹄疫病毒(FMDV)引起猪的临床症状难以区分,并且以SVA作为载体插入FMDV抗原表位外源基因的研究,目前还没有报道。为了构建一种嵌合FMDV抗原表位的重组SVA毒株并进行鉴定,本研究利用基因克隆技术将O型FMDV的B细胞表位与白蛋白信号肽(human albumin signal peptide, HAS)基因串联插入到SVA基因组中,成功构建了重组质粒,转染细胞后拯救出重组病毒rSVA-HAS-OB。结果显示:RT-PCR扩增与基因测序结果表明目的基因正确插入;细胞间接免疫荧光和Western blot鉴定了嵌合抗原蛋白的有效表达;遗传稳定性分析表明重组病毒在25代次的传代过程中仍稳定存在B细胞表位;病毒蚀斑表型和一步生长曲线结果表明,重组病毒与亲本毒株具有相似的增殖特性。本研究成功构建并拯救出能够表达FMDV抗原表位的重组SVA毒株,为以SVA为基础的嵌合病毒及疫苗的研究提供了理论和实验基础。

分类号： S852.65

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