柑橘黄脉病毒一步法RT-PCR快速检测技术探究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘顺民

作者： 刘顺民;杜丹超;蒲占湑;朱莉;张利平;吕佳;黄振东;陈国庆;鹿连明

作者机构：

关键词： 柑橘黄脉病毒;一步法RT-PCR;快速检测

期刊名称： 浙江农业科学

ISSN： 0528-9017

年卷期： 2023 年 64 卷 011 期

页码： 2742-2748

摘要： 本研究通过对柑橘黄脉病毒(citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)的三基因盒基因、病毒外壳蛋白基因及 23K基因序列分析并设计出 7 对引物,对引物特异性和灵敏度进行比较,筛选出能够应用于实验室一步法RT-PCR快速检测CYVCV的引物,由此建立起针对CYVCV一步法RT-PCR快速检测体系.结果表明:引物对 TGB1-F/R能从柑橘总 RNA稀释 160 000 倍(0.004 ng·μL-1)的稀释液中检测出 CYVCV,利用该体系对607 份田间随机样品进行检测,CYVCV 的感染率为 10.05%,说明该体系可靠稳定,适用于实验室里的大量检测;一步法 RT-PCR获得 CYVCV的 TGB1、TGB2、TGB3、CP 和 23K 的特异性片段,片段序列长度分别为 678、327、183、978 和 669 bp,通过克隆和测序结果比对显示,各片段与已报道的 CYVCV 病毒序列具有较高的同源性,同源性均在 99%以上.

分类号： S436.66

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