采用酵母双杂交系统筛选梨PbTMT4互作因子
文献类型: 中文期刊
第一作者: 程寅胜
作者: 程寅胜;杨立;陈健秋;张绍铃;伍涛;张虎平
作者机构:
关键词: PbTMT4;酵母双杂交系统;cDNA文库;互作因子
期刊名称: 湖北农业科学
ISSN: 0439-8114
年卷期: 2019 年 24 期
页码: 240-245
摘要: 为筛选梨糖转运相关蛋白PbTMT4互作因子,基于已经建立好的砀山酥梨果实发育时期的cDNA文库,利用Matchmaker~(TM) Gold酵母双杂交系统,以构建的重组质粒pDHB1-PbTMT4为诱饵质粒,采用PEG/LiAc法转化酵母菌株NMY51。利用表型筛选法检测PbTMT4的自激活作用和毒害作用,利用氨基酸缺陷型培养基筛选PbTMT4互作因子。结果表明,诱饵蛋白PbTMT4在酵母双杂交系统中无毒性和自激活作用。通过酵母双杂交筛选以及测序和序列比对分析,共获得13个与PbTMT4蛋白相互作用的宿主蛋白。
分类号: S661.2
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