细粒棘球蚴Eg95s基因的串联表达及表达系统优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘丹

作者： 刘丹;贾红;侯绍华;丁敏;朱鸿飞

作者机构：

关键词： Eg95s;串联表达;表达系统;优化

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2009 年 36 卷 08 期

页码： 33-37

收录情况： 北大核心

摘要： 为研制新型棘球蚴病基因工程疫苗,根据GenBank公布的细粒棘球蚴Eg95基因序列,针对其中一段348 bp高度亲水的优势表位序列设计引物,扩增Eg95s基因,利用同尾酶法基因同向串联方案,获得3拷贝Eg95s串联体。分别用两种表达载体pGEX-6p-1和pET-32a构建重组质粒,转化入3种大肠杆菌表达宿主BL21(DE3)、Rosseta(DE3)和Origami(DE3),对其进行IPTG诱导表达,经免疫印迹分析结果表明,均能正确表达具有免疫原性的Eg95s蛋白。通过重组蛋白的表达量、可溶性、纯化方法等方面的比较,对Eg95s重组表达系统的载体及宿主菌进行了优化,结果表明,3拷贝的串联Eg95s在以pET-32a为表达载体,Rosseta(DE3)为宿主菌的系统中表达最佳。最终获得了表达量高、可溶性好、纯化方便的Eg95s重组蛋白表达系统,为大规模生产棘球蚴病基因工程疫苗提供了科学依据。

分类号： S852.7

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