猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒双重RT-PCR鉴别方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 刘邓

作者: 刘邓;袁秀芳;徐丽华;牛登元;王朝文;王一成

作者机构:

关键词: 猪流行性腹泻病毒;猪传染性胃肠炎病毒;双重RT-PCR

期刊名称: 动物医学进展

ISSN: 1007-5038

年卷期: 2009 年 30 卷 10 期

页码: 1-5

收录情况: 北大核心

摘要: 根据GenBank发表的猪流行性腹泻病毒(PEDV)CV777株和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)Purdue P115株的基因序列,针对其基因保守区,设计1条共用的下游引物和2条各自病毒的上游引物,可特异扩增出大小分别为213 bp和546 bp目的条带。经过对TaqDNA聚合酶和Mg2+浓度、退火温度(Tm)等PCR反应条件的优化,最终确定该双重RT-PCR的最佳条件为TaqDNA聚合酶浓度为0.03 U/μL,Mg2+浓度为0.05 mmol/L,dNTP浓度为200μmol/L,Tm为51℃。特异性和敏感性检测结果显示,所建立的检测方法具有很好的特异性以及较高的敏感性。

分类号: S854.43

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