编码日本血吸虫Argonaute蛋白全长cDNA克隆、表达及初步鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨燕萍

作者： 杨燕萍;郭素霞;陈晶;林矫矫;刘宗平;程国锋

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;Argonaute蛋白;RACE;功能分析

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2010 年 26 卷 09 期

页码： 830-834

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的获得编码日本血吸虫Argonaute基因的全长cDNA,并进行克隆和重组融合蛋白表达。方法利用RACE技术获得编码日本血吸虫Argonaute基因的全长cDNA并对其进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR(Realtime PCR)分析该基因在日本血吸虫中的转录情况。原核表达保守功能域蛋白和全长蛋白,利用保守功能域重组融合蛋白免疫昆明系小鼠制备多克隆抗体。免疫印迹(Western blot)进行免疫学分析。结果本研究获得了一个编码日本血吸虫Argo-naute基因的全长cDNA,其完整开放阅读框为3 030 bp,编码1 009个氨基酸,预测分子量为111.7 kDa。生物信息学分析表明该基因编码的蛋白序列具有Argonaute家族蛋白的典型结构域特征,且与人、鼠Argonaute蛋白具有较高的同源性。Real-time PCR分析表明该基因在7,14日龄的日本血吸虫童虫中转录较高。Western blot分析制备的多抗具有较高的特异性并能识别全长融合蛋白。结论获得了编码日本血吸虫Argonaute基因的cDNA及重组蛋白,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。

分类号： R383.2

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