猪流行性腹泻病毒N重组表达蛋白间接ELISA检测方法建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 顾昀

作者： 顾昀;周晓丽;袁秀芳;杜晓莉;徐丽华;李军星;方维焕;王一成

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;重组N蛋白;ELISA

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2015 年 30 卷 01 期

页码： 123-129

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了检测猪血清中猪流行性腹泻病毒抗体水平,用纯化的猪流行性腹泻病毒N基因重组表达蛋白作为包被抗原,建立了检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为0.5μg/m L,包被时间4℃过夜,5%脱脂乳的PBS封闭37℃2 h及4℃过夜。血清稀释度为1∶100;37℃作用45 min,辣根过氧化物酶标记兔抗猪Ig G稀释度为1∶10 000,37℃温育60 min,底物显色37℃15 min。抗体临界值为OD450nm≥0.30判为阳性,OD450nm≤0.27判为阴性,介于二者之间判为可疑。经重复性试验和交叉试验,结果表明,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。用已建立的ELISA方法检测临床血清样本184份,总阳性率为68.5%。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]猪流行性腹泻病毒N基因的表达及抗原性分析. 吴玉璐,朱建平,杨莘,王亚欣,徐彦召,虞凌雪,于海,刘光清,童光志,周艳君. 2013

[2]应用重组N蛋白-ELISA检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究. 王云峰,周艳君,仇华吉,钱平,蔡雪晖,柴文君,童光志. 2001

[3]猪繁殖与呼吸综合征重组核衣壳蛋白(N)-ELISA诊断方法的建立与应用. 王云峰,周艳君,仇华吉,钱平,蔡雪晖,柴文君,童光志. 2000

[4]间接ELISA检测猪流行性腹泻病毒的抗体水平. 邹勇,唐永兰,苏万国,许大新,陈培龙,钱永清. 2000

[5]猪流行性腹泻病毒血清中特异性IgG抗体间接ELISA检测方法的建立. 谷长维,谷长乐,胡博. 2022

[6]猪流行性腹泻病毒IgA抗体ELISA检测方法的建立和初步应用. 王婉莹,石正旺,罗俊聪,廖焕程,冯露,郑海学,田宏,蔺国珍. 2024

[7]犬瘟热重组N蛋白抗原间接ELISA方法的建立及应用. 姜骞,周洁,刘家森,李慕瑶,司昌德,韩凌霞,孟庆文,陈洪岩,曲连东. 2008

[8]重组N蛋白抗原检测美洲型PRRSV抗体间接ELISA方法的建立. 丛晓燕,吴家强,李俊,时建立,孙文博,王金宝. 2010

[9]猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白抗原间接ELISA抗体检测方法的建立. 孙东波,冯力,时洪艳,刘胜旺,陈洪岩,佟有恩,李伟杰,王明,马思奇,陈建飞. 2006

[10]猪传染性胃肠炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 王赛,苏菲,袁秀芳,徐丽华,李军星,余兴龙. 2018

[11]牛副流感病毒3型核衣壳蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立. 李德栋,向文杰,林俊,朱远茂,薛飞. 2019

[12]猪流行性腹泻病毒N蛋白的原核表达及生物学活性鉴定. 陈如敬,吴学敏,车勇良,王隆柏,魏宏,庄向生,刘玉涛,严山,周伦江. 2013

[13]猪流行性腹泻病毒TX株的分离鉴定及毒力分析. 于晓明,陈瑾,侯立婷,吴楠,侯继波,郑其升. 2015

[14]表达猪流行性腹泻病毒S基因片段重组腺病毒的构建与免疫特性. 韦显凯,侯继波,姜平. 2008

[15]我国华东地区猪流行性腹泻病毒ORF3基因的遗传变异分析. 邓小红,余伟权,李彬,孙冰,徐向伟,刘浩飞,何孔旺,郭容利,俞正玉. 2015

[16]PEDV亚单位疫苗免疫增强剂的筛选. 陈瑾,黄春娟,于晓明,侯立婷,乔绪稳,郑其升,侯继波. 2016

[17]利用玉米作为生物反应器表达PEDV中和表位抗原蛋白. 满坤,杨兵,薛静,覃湘婕,周宏专. 2014

[18]规模化猪场流行性腹泻的分析. 陈建飞,冯力,时洪艳,张鑫. 2012

[19]猪腹泻病例中PEDV、TGEV及PRV的感染调查. 孙振钊,赵伟男,王靖飞. 2014

[20]猪流行性腹泻病毒HeB10/2014株的分离与鉴定. 王康,王鑫,杨德强,侯怡轩,谢春. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序