5'UTR缺失重组塞内卡病毒的构建与生物学特性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张岩

作者： 张岩;杨帆;曹伟军;杜晓莉;郑海学;包世俊

作者机构：

关键词： 塞内卡病毒(SVA);5’UTR;缺失;重组病毒;生物学特性

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2025 年 33 卷 009 期

页码： 2092-2100

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)是属于塞内卡病毒属的小RNA病毒,感染该病毒后可引发原发性猪(Sus scrofa)的水疱病,在临床上很难与口蹄疫、猪水泡病和水疱性口炎区分.本研究成功从临床中分离鉴定了1株SVA变异毒株,发现其5'UTR存在13个核苷酸(nucleotide,nt)缺失.为了研究该缺失对SVA生物学特性的影响,本研究利用反向遗传技术,以SVA CH/FJ/2017毒株的全长cDNA感染性克隆为基础,对其基因组5'UTR序列进行定向缺失,将重组质粒转染BHK-21细胞,拯救出1株5'UTR基因缺失的塞内卡病毒rSVA-5UTRM,利用间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)和Western blot对重组毒株进行鉴定;并将重组病毒在BHK-21细胞上连续传代,进行遗传稳定性分析;然后通过蚀斑试验和病毒生长曲线比较重组病毒与亲本毒株在BHK-21细胞上的增殖特性.结果显示,重组病毒能够与SVA抗体及SVA VP2抗体发生特异性反应,表明重组毒株拯救成功;遗传稳定性分析结果显示,5'UTR基因缺失的重组病毒传代至20代,缺失基因仍稳定存在,表明重组毒株具有良好的遗传稳定性;生物学特性分析结果表明,重组毒株与亲本毒株SVA CH/FJ/2017在BHK-21细胞上的复制特性相近,且具有较高的病毒滴度,表明5'UTR中13 nt的核苷酸缺失并不影响病毒在BHK-21细胞上的复制.本研究成功拯救出5'UTR缺失的重组SVA毒株,研究了缺失区段的功能,为阐明SVA非编码功能提供了新的科学数据.

分类号： S855.3

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