基于DNA-launched的猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作系统的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曹宗喜

作者： 曹宗喜;焦培荣;谭树义;叶保国;亓文宝;张桂红

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;反向遗传操作系统;构建

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2016 年 37 卷 11 期

页码： 1-8

收录情况： 北大核心

摘要： 为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反向遗传操作系统,将PRRSV全基因组分6段克隆,构建获得6个重组质粒,先由A1和A2片段或B1和B2片段连接构成A片段或B片段,然后D、C、B和A片段依次亚克隆入pOKq载体。在基因组5′端和3′端分别加上CMV启动子序列和BGH终止信号肽,全基因组510位核苷酸突变引入遗传标记位点FseⅠ。测序正确的全基因组质粒命名为pOK-A2BCD。再将pOK-A2BCD质粒转染BHK-21细胞,拯救病毒通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定,结果表明拯救病毒成功,为进一步研究PRRSV致病性等相关分子机制奠定了基础。

分类号： S852.651

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