口蹄疫病毒3C基因与增强型绿色荧光蛋白基因的真核共表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 魏衍全

作者： 魏衍全;田宏;吴锦艳;陈妍;尚佑军;窦永喜;刘湘涛;才学鹏

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;3C基因;增强型绿色荧光蛋白;真核共表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2011 年 05 期

页码： 479-483

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为验证siRNAs对口蹄疫病毒(FMDV)复制的抑制效果,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增Asia 1型口蹄疫病毒Jiangsu/China/2005株的3C基因,克隆入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-N1中,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染PK-15细胞,检测EGFP的表达和3C基因转录水平。结果显示,经PCR及双酶切鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与Jiangsu/China/2005株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内有EGFP表达,实时荧光定量PCR检测到细胞内有3C基因的转录。证实,成功构建了FMDV 3C基因与EGFP共表达质粒并在PK-15细胞中获得了表达。

分类号： S852.659.6

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