阪崎克罗诺杆菌双抗夹心酶联免疫吸附检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张欣

作者： 张欣;王福成;韩先干;祁克宗;宋祥军;董雨豪;蒋蔚

作者机构：

关键词： 阪崎克罗诺杆菌;单克隆抗体;双抗体夹心ELISA

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2024 年 56 卷 004 期

页码： 66-71

收录情况： 北大核心

摘要： 为建立阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)的免疫学快速检测方法,分别制备了阪崎克罗诺杆菌的特异性单抗和多抗,建立阪崎克罗诺杆菌的双抗夹心酶联免疫吸附 DAS-ELISA 检测方法.结果:获得 4 株抗阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体阳性细胞株,分泌抗体效价分别是1 ∶ 128 000、1 ∶ 32 000、1 ∶ 256 000 和1 ∶ 256 000,抗阪崎克罗诺杆菌兔多克隆抗体效价是1 ∶ 128 000.建立的阪崎克罗诺杆菌DAS-ELISA检测方法,分别以抗阪崎克罗诺杆菌兔多抗和单抗作为捕获抗体和检测抗体,兔多抗的最佳稀释度为 1 ∶ 4 000,单克隆抗体最佳稀释度为 1 ∶ 1 000,灵敏性可达 1×106 CFU/mL;该检测方法具有良好的特异性,与常见的 6 种食源性病原菌都没有交叉反应,且能够同时检测 6 种克罗诺杆菌属细菌;重复性结果显示,该检测方法的批内批间变异系数均小于15%,具有良好的重复性.综上,利用抗阪崎克罗诺杆菌的单抗和兔多抗成功建立了DAS-ELISA方法,该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可为阪崎克罗诺杆菌的快速检测提供技术支撑.

分类号： S941.42

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