猪伪狂犬病毒荧光重组酶介导核酸扩增快速检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 谢明杰

作者： 谢明杰;康龙滨;陈秋勇;吴学敏;王隆柏;周伦江;刘玉涛

作者机构：

关键词： 猪伪狂犬病毒;荧光重组酶介导核酸扩增;检测方法

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2024 年 39 卷 007 期

页码： 753-758

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】基于荧光重组酶介导核酸扩增（Recombinase-aided amplification, RAA）技术，建立一种猪伪狂犬病毒（Porcine pseudorabies virus, PRV）快速检测方法。【方法】根据PRV gE基因序列，设计特异性引物及探针，优化扩增体系，建立PRV荧光重组酶介导核酸扩增检测方法，检验其特异性、敏感性和重复性，应用该方法对临床样品进行检测。【结果】该方法在43℃恒温反应23 min即可完成PRV核酸扩增，最低检出限为111 copies·μL-1；与猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）、猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemicdiarrheavirus,PEDV）、猪轮状病毒（Porcinerotavirus,PoRV）、猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus, TGEV）、猪圆环病毒2型（Porcine circovirus 2, PCV2）、猪圆环病毒3型（Porcine circovirus 3,PCV3）均无交叉反应。重复性试验显示，组内和组间变异系数均小于5%;40份临床样品检测结果显示PRV阳性率为15%(6/40)，检测结果与常规聚合酶链式反应（PCR）一致。【结论】成功建立了简便快速、高效准确的PRV实时荧光RAA检测方法，为PRV的快速检测和流行病学调查提供了新的检测手段。

分类号： S858.28

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