TMV、CMV和PVY三重荧光定量PCR同步检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 白静科

作者： 白静科;牛龙龙;吴彦辉;李建华;李小杰;李成军;李淑君

作者机构：

关键词： 烟草普通花叶病毒;黄瓜花叶病毒;马铃薯Y病毒;三重荧光定量PCR

期刊名称： 中国烟草科学

ISSN： 1007-5119

年卷期： 2023 年 44 卷 005 期

页码： 55-61

收录情况： CSCD

摘要： 为建立同时检测烟草普通花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)和马铃薯Y病毒(PVY)的多重荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中TMV、CMV及PVY的CP基因保守序列设计引物和探针,并对反应体系进行了优化,建立了可同时检测TMV、CMV和PVY的三重荧光定量PCR方法,并评价了该方法的敏感性、特异性、重复性及准确性.结果显示,建立的方法中TMV、CMV和PVY的检测下限分别为 2.60×101、1.25×101、2.33×101 copies/μL,检测灵敏度比普通PCR法提高 10 倍;该方法可特异性检测出TMV、CMV和PVY,但烟草蚀纹病毒(TEV)、烟草脉带花叶病毒(TVBMV)和番茄斑萎病毒(TSWV)无法检出且无交叉反应,批内与批间重复性试验变异系数均小于1.5%,24份样本检测结果中TMV、CMV和PVY的阳性检出率分别为75%、100%和41.67%,且三重荧光定量PCR方法与普通单重PCR方法得出一致的检测结果.结果表明本研究建立的三重荧光定量PCR检测方法具有特异性强、稳定性好、准确性高等优点,可为后续TMV、CMV和PVY的病害诊断与流行调查提供技术支持.

分类号： S435.72

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