柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d基因的酵母表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孔春林

作者： 孔春林;韩红玉;姜连连;王晔;董辉;赵其平;朱顺海;李婷;薛璞;舒凡帆;黄兵

作者机构：

关键词： 球虫;柔嫩艾美耳球虫;真核起始因子3d;毕赤酵母;真核表达

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2012 年 20 卷 02 期

页码： 47-52

摘要： 在毕赤酵母真核表达系统中表达柔嫩艾美耳球虫真核起始因子3d(Emeria tenella eukaryotic initiation factor 3d,EteIF3d)基因,并获得具有天然构象的活性蛋白。将EteIF3d基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,将构建正确的重组质粒通过电激转化入酵母细胞GS115,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选,获得含重组质粒的酵母表达细胞。在含1%甲醇的BMMY培养基中诱导培养,收集1~3 d的表达上清。表达产物进行SDS-PAGE检测,并用Western blot进行免疫学分析。结果表明,本研究成功构建了重组质粒pPIC9k-EteIF3d,并成功表达该蛋白,且该蛋白能与兔抗EteIF3d血清特异性结合,具有良好的抗原性。EteIF3d基因可在真核表达系统毕赤酵母中表达,且获得蛋白具有抗原性,从而为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础。

分类号： S852.7

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