IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 周宇

作者: 周宇;王永山;范红结;欧阳伟;唐雨德;王忠灿

作者机构:

关键词: 传染性法氏囊病病毒;VP2基因;抗原表位;组合基因;表达

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2010 年 10 期

页码: 1301-1306

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBac HT中,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac HT-VP2-5e,用脂质体法转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒vBac HT-VP2-5e。对vBac HT-VP2-5e感染的Sf9细胞,以间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;电镜检查,重组VP2-5e蛋白能够自组装成病毒样颗粒(VLP);用免疫印迹分析(Western-blotting),在59 000处出现一条特异性蛋白条带。本试验为组合基因型重组IBD多价疫苗的研究奠定了基础。

分类号: S852.65

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