PCV2感染性分子克隆的制备及体内外感染性试验

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩凌霞

作者： 韩凌霞;刘建华;陈艳;仇华吉;王云峰;童光志

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2;病毒分子克隆;感染性

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2006 年 28 卷 03 期

页码： 241-247+270

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将猪圆环病毒2型(Type2porcinecircovirus,PCV2)JXL株cDNA插入到载体pMD18-T中,获得的pMDT-PCV转染猪肾细胞PK15细胞系,盲传4代后,利用PCV2阳性猪血清进行间接免疫荧光抗体试验(IFA),能检测到特异性荧光。将pMDT-PCV质粒DNA经腹股沟淋巴结注射40日龄仔猪2头,分别接种2、3次,接种剂量500μg/次,首次注射35d心脏放血致死。在体内感染性试验期间,动物未出现明显临床症状。试验结束,病理切片结果显示,不同淋巴组织中分别存在淋巴细胞缺失或增多的现象;肾小球、扁桃体、空肠淋巴结和股前淋巴结等冰冻组织切片中存在大量PCV2病毒抗原;血清中PCV2特异性的ELISA抗体效价达12∶560,IFA效价为11∶280;通过聚合酶链式反应(PCR)可以分别从体外感染PK15细胞和体内感染动物及同圈饲养的空白对照猪的淋巴组织中扩增到病毒特异性基因片段。本研究证明含有单拷贝PCV2的重组质粒pMDT-PCV在体内、外均具有感染性,能衍生出病毒,并产生符合自然感染PCV2的大体病变和组织病理学变化,并激发较强的体液免疫应答。

分类号： S852.65`S858.28

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