反义RNA重组逆转录病毒逆转录套式PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 曹素芳

作者: 曹素芳;孟庆文;于康震;单文鲁

作者机构:

关键词: 重组逆转录病毒;反义RNA;逆转录套式PCR;病毒效价

期刊名称: 中国兽医科技

ISSN: 1000-6419

年卷期: 2005 年 35 卷 08 期

页码: 611-614

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为探求一种快速检测反义RNA重组逆转录病毒效价的新方法,用脂质体介导法将反义RNA重组逆转录病毒载体pLXSA、pLXSB分别转染包装细胞系PA317,经G418筛选,获得数个稳定的产毒细胞克隆,择优挑选7个细胞克隆扩增培养,收集细胞上清,用异硫氰酸胍-酚一步法提取病毒RNA,进行逆转录套式PCR,检测细胞上清中的反义RNA重组逆转录病毒效价,同时用传统方法(小鼠成纤维放大法)进行测定。2种方法检测结果的比较表明,逆转录套式PCR法的特异性和敏感性均高于小鼠成纤维放大法,是一种敏感性高、特异性强、操作简便、快速的检测逆转录病毒效价的新方法。

分类号: Q789

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