人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的克隆及在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李俏俏

作者： 李俏俏;王清路;张玉军;张锐;徐寿增

作者机构：

关键词： 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子;毕赤酵母;引物5'端加长法;糖基化

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1671-8135

年卷期： 2010 年 30 卷 01 期

页码： 35-40

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用加长引物5'端的方法克隆了hGM-CSF的编码基因,克隆过程中对该基因的局部做了密码子优化。然后克隆进毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,电击转化毕赤酵母。PCR、SDS-PAGE与Western blotting证实hGM-CSF已整合进酵母基因组,摇瓶水平粗蛋白表达量达389mg/L,动物实验证实蛋白产物活性正常,SDS-PAGE与N-糖苷酶F去糖基化分析发现hGM-CSF被糖基化。

分类号： Q78

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