布鲁菌抗体阻断ELISA检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋国栋

作者： 宋国栋;葛家振;Weldeab Solomon;刘一健;高鹏程;王梓晴;郭双双;谢莹影;储岳峰;郑福英

作者机构：

关键词： 布鲁菌;脂多糖;单克隆抗体;阻断ELISA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 55 卷 008 期

页码： 1018-1025

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在使用布鲁菌脂多糖（LPS)和HRP标记的单克隆抗体（HRP-m Ab）建立阻断ELISA抗体检测方法，并评价其检测性能以及初步应用。结果显示，当布鲁菌LPS的包被量为400 ng/孔，10 g/L阿拉伯树胶溶液封闭2 h，血清稀释4倍后37℃孵育20 min，稀释度为1∶6 000的HRP-m Ab 37℃孵育20 min，显色10min时为最佳反应条件，该方法的临界值为PI=46.7%。该方法的最低检测水平为3.125 IU/m L，与常见的细菌病阳性血清无交叉反应，批内和批间变异系数均小于10%，具有良好的敏感性、特异性和重复性。该方法可检测牛、羊、鹿、犬等宿主的布鲁菌阳性血清。使用建立的阻断ELISA方法检测284份临床血清，与虎红凝集试验、竞争ELISA和间接ELISA试剂盒的符合率分别达到97.18%(276/284)、98.59%(280/284)和96.13%(273/284)。结果表明，建立了敏感性高、特异性好、重复性好的布鲁菌抗体阻断ELISA检测方法，全部反应过程不超过1 h，并且可检测多物种布鲁菌阳性血清。该方法弥补了我国布鲁菌抗体阻断ELISA检测技术的空白，为布鲁菌病的快速诊断以及免疫水平监测提供了技术支持。

分类号： S852.61

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