兰州百合DNA提取方法比较及RAPD体系的快速优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 崔文娟

作者： 崔文娟;林玉红;欧巧明;石有太;罗俊杰

作者机构：

关键词： 兰州百合;DNA提取;RAPD-PCR;体系优化

期刊名称： 甘肃农业科技

ISSN： 1001-1463

年卷期： 2017 年 01 期

页码： 8-12

摘要： 以兰州百合鳞片和叶片为试材,采用改良CTAB法获得了高质量的基因组DNA。为优化兰州百合RAPD-PCR反应体系,利用正交试验设计,对兰州百合RAPD-PCR反应体系中的5种主要因素进行4水平共计16个组合设计,并选用3种反应程序,通过琼脂糖凝胶电泳结果分析,最终获得最佳反应体系为:20 u L反应体系中含30 ng模板DNA、0.5μmol/L随机引物、0.2 mmol/L d NTPs、2.25 mmol/L MgCl_2,及1.5U Taq DNA聚合酶。最佳反应程序:94℃预变性4 min;94℃变性1 min,36℃退火1.5 min;72℃延伸2 min;35个循环;最后72℃延伸7min。

分类号： S682.29

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