文献类型： 中文期刊
第一作者： 王西西
作者： 王西西;吴映彤;吴竞;陈鸿军;郭晓宇;朱鸿飞
作者机构：
关键词： 非洲猪瘟病毒;UK基因;DP96R蛋白;原核表达;多克隆抗体
期刊名称： 中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2018 年 05 期
页码： 10-15
收录情况： 北大核心
摘要： 本研究旨在采用原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1毒株毒力基因UK,获得重组蛋白(DP96R),进一步制备并鉴定DP96R重组蛋白的多克隆抗体。首先构建原核重组表达质粒pET-28a-UK并转化BL21感受态细胞,在16℃、0.4 mmol/L IPTG条件下诱导10 h后,检测到目的蛋白以可溶性表达为主,蛋白分子量约为15 kDa。然后采用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗DP96R蛋白多克隆抗体。ELISA结果表明制备的多抗具有良好反应性,Western blot和免疫荧光实验(immunofluorescence assay,IFA)表明制备的多抗能特异性识别真核表达的DP96R蛋白。DP96R重组蛋白及多克隆抗体的制备为进一步研究DP96R蛋白的生物学功能以及建立ASFV毒株鉴别诊断的血清学检测方法奠定了基础。
分类号： S852.651
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