基因枪法介导转人工合成Rs-AFP2基因小麦的获得和检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 廖勇

作者： 廖勇;张增艳;徐惠君;杜丽璞;姚乌兰;辛志勇;任正隆

作者机构：

关键词： 萝卜抗菌肽Rs-AFP2;小麦;转基因;载体构建

期刊名称： 麦类作物学报

ISSN： 1009-1041

年卷期： 2006 年 26 卷 04 期

页码： 15-19

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 萝卜(Raphanus sativus)抗菌肽Rs-AFP2在体外强烈抑制小麦赤霉病菌(Fusarium graminea-rum)、黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)、烟草赤星病(Alternaria longipes)的菌丝生长。为了研究Rs-AFP2在小麦抗病育种上的应用潜力,人工合成了Rs-AFP2基因。通过基因重组技术(包括限制性内切酶酶切和连接),将人工合成的Rs-AFP2基因替代单子叶高效组成型表达载体pAHC25中的GUS基因,构建了Rs-AFP2基因的单子叶高效表达载体pUAFP2。该载体除携带受Ubiquitin启动子控制的Rs-AFP2基因表达盒外,还具有1个受Ubiqutin启动子控制的Bar基因表达盒,后者可为后续利用除草剂Bialaphos筛选转化再生植株提供抗性;采用基因枪法轰击小麦品种扬麦12、济麦19、晋麦47和豫麦34幼胚共4 042个,经过2~3次Bialaphos筛选,最终获得扬麦12再生植株316株;利用高效表达载体pUAFP2的Bar和Rs-AFP2基因的特异引物对上述成活的转化植株进行PCR检测,获得Bar和Rs-AFP2基因均为阳性的植株58株,转化率为1.43%。

分类号： S512.1

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