发根农杆菌介导甜瓜转基因过表达体系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王平勇

作者： 王平勇;徐永阳;赵光伟;贺玉花;李明;孔维虎;张健;刘水苗;刘梦丽;徐志红

作者机构：

关键词： 甜瓜;发根农杆菌;K599;过表达

期刊名称： 中国瓜菜

ISSN： 1673-2871

年卷期： 2019 年 12 期

页码： 15-18+30

收录情况： 北大核心

摘要： 遗传转化是实现基因功能验证和基因快速转育的重要手段,但目前甜瓜的遗传转化依旧存在众多技术难题。笔者利用野生型发根农杆菌K599侵染甜瓜'E31',成功诱导甜瓜产生了不定根。借助该技术,将含有GUS基因和EGF基因的过表达载体pCAMBIA3301和pCAMBIA1300-ProSuper导入发根农杆菌K599,利用转化后的农杆菌侵染甜瓜'E31',成功诱导出了不定根。PCR检测结果表明,新生不定根的阳性率达到100%。通过GOS染色和激光共聚焦显微镜检测,在不定根中检测到GOS基因和EGFP基因的大量表达,成功实现了外源基因在甜瓜新生不定根内过表达。该方法周期短、操作方便、转化率高,可实现基因功能的快速验证,为甜瓜根系抗病抗逆方面的研究提供技术支持。

分类号： S652

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