番茄LeDREB1转录因子基因RNAi载体的构建和鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 王迎波

作者: 王迎波;单曙光;王贺;王磊;白由路;程宪国

作者机构:

关键词: LeDREB1;转录因子;载体构建;siRNA;番茄

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2010 年 09 期

页码: 106-110+122

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用rd29A基因启动子的DRE元件从番茄(丽春)cDNA文库中通过酵母单杂交技术筛选得到转录因子基因LeDREB1。核苷酸序列测定结果表明,该基因片段全长1 782 bp,具有900 bp的cDNA开放阅读框序列,编码300个氨基酸。该基因属于AP2/EREBP家族[1],可能调控许多逆境应答基因的表达。运用RNA干扰的思路,设计特异性引物,扩增正向和反向基因片段。将LeDREB1正向+反向基因片段插入到pCAMBIA2300-OCS的35s启动子下游,构建干扰载体pCAM-RNAi-LeDREB1,通过酶切和测序鉴定证明目的片段与载体片段连接正确。这一载体的成功构建为进一步研究LeDREB1的功能和调控作用机制提供有效的材料与技术支撑。

分类号: Q943.2`S641.2

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