番鸭源禽1型副黏病毒HN基因主要抗原结构域和V基因融合表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 傅光华

作者： 傅光华;程龙飞;施少华;陈红梅;彭春香;黄瑜

作者机构：

关键词： 番鸭源;禽1型副黏病毒;HN基因主要结构域;V基因;融合表达载体

期刊名称： 吉林农业大学学报

ISSN： 1000-5684

年卷期： 2009 年 31 卷 01 期

页码： 88-91+105

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建番鸭源禽1型副黏病毒HN主要抗原结构域(HNd)和V基因融合表达载体,经PCR及融合PCR分别从重组质粒pMDHN和pMDP中扩增HN基因主要结构域和V基因cDNA。将HNd经KpnⅠ和BamHⅠ双酶切、V基因用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别定向插入真核载体pcDNA3的多克隆位点相应的酶切位点中,对2个单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV进行酶切和测序鉴定。利用融合PCR技术扩增出HNd-V基因,定向克隆至pcDNA3的EcoRⅠ和XhoⅠ酶切酶切位点之间,转化感受态细胞后,经PCR反应初筛后,对阳性克隆进行酶切分析及测序鉴定。对单表达重组质粒进行酶切分析及测序鉴定,结果表明:HNd和V基因已被正确定向克隆至真核表达载体pcDNA3,成功构建了2个基因的单表达质粒pcDNAHNd和pcDNAV;对融合重组质粒酶切分析和测序鉴定表明,HNd-V融合基因正确克隆进真核表达质粒pcDNA3中,成功构建了融合表达载体pcDNAHNd-V。

分类号： S852.65

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