猪轮状病毒OSU强毒株vp7基因的克隆及其抗原表位原核表达和免疫学活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 时洪艳

作者： 时洪艳;冯力;陈建飞;孙东波;吴波平

作者机构：

关键词： 猪轮状病毒;vp7基因;克隆;原核表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2008 年 30 卷 02 期

页码： 136-140

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 参照GenBank中所收录的猪轮状病毒OSU株序列设计了一对特异性引物,RT-PCR扩增出1062bp的vp7全长基因,与参考OSU序列的核苷酸同源性达99.8%,克隆到pMD18-T载体中,获得pMD18-T-vp7阳性质粒。以阳性质粒为模板,利用引入BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物进行PCR扩增得到含有VP7中和抗原表位区域639bp的基因片段,定向克隆到表达载体pGEX-6P-1中,经酶切PCR鉴定的阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG(终浓度为1.0mmol/mL)37℃诱导4h后,SDS-PAGE电泳显示表达了大小约50ku带GST标签的融合蛋白,薄层扫描显示蛋白表达融合量占菌体总蛋白的33.2%。Western blot分析表明该VP7重组蛋白可与PRV阳性血清特异性反应。

分类号： S852.5

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