鼠脑心肌炎病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蔡骁垚

作者： 蔡骁垚;张泉;陈懿斐;林颖峥;熊炜;魏晓锋;陈鸿军

作者机构：

关键词： 鼠脑心肌炎病毒;EMV;TaqMan探针;荧光定量RT-PCR

期刊名称： 实验动物科学

ISSN： 1006-6179

年卷期： 2017 年 34 卷 05 期

页码： 13-17

摘要： 目的建立快速诊断鼠脑心肌炎病毒感染的荧光定量RT-PCR方法。方法根据鼠脑心肌炎病毒(EMV)PEC9毒株全基因组序列(Gen Bank登录号:DQ288856.1),设计一对特异性引物和TaqMan探针,建立EMV的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性。结果建立的荧光定量PCR方法,标准曲线的线性关系良好,r2值可达0.99,敏感性最低检测限为1个拷贝数,高于普通PCR方法 1000倍,其特异性强,与其他常见感染的小鼠病毒株均无特异性扩增,批内和批间变异系数均小于2%。利用该方法对上海市120份小鼠心肌样品进行检测,未检测到阳性感染。结论本研究为鼠脑心肌炎病毒感染的分子检测,为制定国家标准提供良好的方法。

分类号： Q95-33

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