荧光显色技术在鸭坦布苏病毒LAMP检测方法中的应用及比较

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张伟

作者： 张伟;逯茂洋;黄庆华;杨少华;胡北侠;许传田;伊惠;张琳;张秀美

作者机构：

关键词： 鸭坦布苏病毒;环介导等温扩增;荧光显色剂

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 04 期

页码： 406-411

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 参考NCBI中已收录的鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因保守区域设计了6条引物,通过对反应体系中各组分和条件进行优化,建立了DTMUV环介导等温扩增(LAMP)检测体系,并应用荧光显色剂(SYBR GreenⅠ和钙黄绿素、锰离子)对扩增产物进行可视化判定。结果显示,以SYBR GreenⅠ为染料,显色敏感性为10copies/μL的病毒,比普通PCR高100倍;以钙黄绿素和锰离子组合作为显色剂,其显色极限为1 000copies/μL的病毒,虽低于SYBR GreenⅠ的显色敏感性,但能有效地避免气溶胶造成的空气环境污染。结果表明,本研究建立的荧光显色LAMP体系敏感性高、能避免交叉污染,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力,能够为从源头遏制该病的发生和蔓延提供有效的手段。

分类号： S852.657

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