预扩增qPCR技术检测少量猪早期胚胎细胞基因表达的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 晏超

作者： 晏超;刘永刚;谢浩;彭翠婷;张才用;赵玉兰;齐霖;陈指龙;唐中林

作者机构：

关键词： 预扩增;qPCR;猪早期胚胎;微量细胞;基因表达

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2024 年 55 卷 012 期

页码： 5567-5574

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在比较3种qPCR方法检测少量猪早期胚胎细胞多能性和组蛋白乙酰化修饰相关基因的动态表达情况。本研究收集不同时期(1-细胞、2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑葚胚和囊胚)猪孤雌激活胚胎，利用常规RT-qPCR、cDNA预扩增qPCR和样本直接预扩增qPCR检测微量胚胎细胞多能性和组蛋白乙酰化修饰相关基因的表达情况。结果显示，预扩增qPCR具有稳定的扩增曲线，熔解曲线呈现稳定单峰，而常规RT-qPCR检测的扩增曲线循环阈值在35以上，熔解曲线呈现多峰；胚胎细胞直接预扩增后的样品稀释20 000倍仍能检测目的基因的表达，且能稳定检测单个胚胎细胞的基因表达情况；多能性和组蛋白乙酰化修饰相关基因在猪孤雌激活早期胚胎发育过程中呈现先升高后降低的表达趋势，在基因组激活阶段的表达水平最高。综上表明，样本直接预扩增qPCR的检测灵敏性和准确性更高，且操作相对简单、成本较低，适用于微量胚胎细胞的基因表达检测，可为研究早期胚胎发育机制提供方法参考。

分类号： S828.2

  • 相关文献

[1]脂肪型和瘦肉型北京鸭A-FABP基因组织表达特征. 荣光辉,徐琪,徐铁山,谢明,黄苇,赵文明,侯水生. 2015

[2]响应黄龙病侵染的柑橘乙醇脱氢酶基因CsADH1的克隆与表达分析. 谢竹,赵珂,郑林,龙俊宏,杜美霞,何永睿,陈善春,邹修平. 2020

[3]小麦叶片cDNA-AFLP扩增反应体系的优化. 李剑峰,张跃强,樊哲儒,王岩军,王浩,曲延英,范玲. 2010

[4]绵羊和山羊嗜血支原体感染的检测及分子鉴定. 王绍伟,简莹娜,赵萍,陈胜利,郝华芳. 2016

[5]牙鲆(Paralichthys olivaceus)Hsp90 mRNA在温度刺激和鳗弧菌感染下的表达特征. 生安志,鞠辉明,李贵阳,李杰,莫照兰. 2016

[6]玉蜀黍黑粉菌环介导等温扩增检测体系的建立及应用. 段丽萍,曹言勇,李会勇,陈洵,石磊. 2018

[7]ACT1-qPCR定量分析弓形虫内参引物的筛选与鉴定. 郭海婷,陈志宝,李中原. 2018

[8]用于荔枝qPCR分析的内参基因克隆及稳定性分析. 魏永赞,赖彪,胡福初,李晓静,胡桂兵,王惠聪. 2012

[9]绿盲蝽八个普通气味受体基因的克隆及功能鉴定. 李彬,张赛,王晨蕊,王桂荣,刘杨. 2020

[10]体外法研究酵母发酵饲料对瘤胃发酵参数及瘤胃细菌数量的影响. 张棋炜,张政,杨晶晶,高民,胡红莲,刘大程. 2017

[11]霍山石斛PMM基因的克隆及其表达分析. 林榕燕,钟淮钦,叶秀仙,黄敏玲. 2017

[12]东北黑土nirS型反硝化细菌群落和网络结构对长期施用化肥的响应. 胡晓婧,刘俊杰,于镇华,魏丹,周宝库,陈雪丽,王光华. 2020

[13]花鲈病毒感染后qPCR内参基因的筛选与应用. 杨宏伟,刘振兴,郝乐,马江耀,梁志凌,马艳平,曹俊明. 2020

[14]玉米ZmbHLH161基因的克隆及功能研究. 吴忠义,杨梦婷,张春,王作平,邹华文. 2020

[15]杂交兰镁原卟啉Ⅸ甲酯环化酶基因的克隆与转录表达分析. 林榕燕,陈艺荃,吴建设,林兵,叶秀仙,钟淮钦. 2020

[16]霍山石斛托品酮还原酶基因的克隆及其表达分析. 林榕燕,叶秀仙,钟淮钦,黄敏玲. 2017

[17]香蕉海藻糖-6-磷酸合成酶基因MaTPS2克隆及表达特性分析. 王安邦,吴琼,舒海燕,许桂莺,苗红霞,柯建浩,贾彩虹,邢文婷,许奕. 2016

[18]多房棘球绦虫apomucin基因qPCR引物的筛选及潜在应用. 苏梦,郭小腊,杨静,邵忠伟,丁军涛,项海涛,骆学农,郑亚东,孙晓林. 2016

[19]亚洲璃眼蜱不同发育阶段及其组织中microRNA-10表达分析. 袁小松,罗金,田占成,谢俊仁,王芳芳,田美媛,张以芳,刘光远. 2014

[20]Dsg4基因在苏博美利奴羊毛囊发育不同时期及不同组织中的表达差异. 朱桦,潘家华,徐新明,付雪峰,田月珍,阿布来提·苏来曼,黄锡霞,田可川. 2018

作者其他论文 更多>>

微信小程序