利用杆状病毒表达系统表达猪IFN-L3及其抗PEDV活性的研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 郭珊珊
作者: 郭珊珊;陈伟业;薛美;尹灵丹;罗毅;冯力;刘平黄
作者机构:
关键词: 猪干扰素L3;Bac-to-Bac杆状病毒表达系统;昆虫细胞;猪流行性腹泻病毒
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2019 年 010 期
页码: 1269-1276
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞上表达重组猪干扰素L3(rPoIFN-L3)进行抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的研究.首先通过间接免疫荧光和Western-blot验证rPoIFN-L3表达,并用Protein A亲和层析柱进行蛋白纯化;采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV~*GFP)检测rPoIFN-L3的抗病毒活性,含rPoIFN-L3的细胞上清的抗病毒活性为1*10~3AU/mL,纯化的rPoIFN-L3抗病毒活性为5*10~5AU/mg.进一步对纯化的rPoIFN-L3蛋白在IPEC-J2细胞上进行抗PEDV活性探究,结果显示,rPoIFN-L3可呈剂量依赖性抑制PEDV复制,并且上调相关干扰素-刺激基因(ISGs)的表达.由此证明,本研究表达的rPoIFN-L3具有抗病毒活性,并可有效抑制PEDV在IPEC-J2上的复制,对预防和治疗PEDV感染有重要意义.
分类号: S852.65
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