染料法实时荧光PCR检测牛嵴病毒

文献类型： 中文期刊

第一作者： 师志海

作者： 师志海;王文佳;王亚州;孟红丽;闫祥洲;成海建;施巧婷;王二耀;徐照学

作者机构：

关键词： 牛嵴病毒;犊牛腹泻;EvaGreen染料

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 012 期

页码： 1498-1503

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 牛嵴病毒（BKoV）可能是与犊牛腹泻相关的潜在病原,为建立快速检测BKoV的方法,本研究根据BKoV 3D基因的保守序列,设计特异性引物对,通过优化反应条件和体系,建立了基于Eva Green染料检测BKoV的实时定量PCR方法。该方法 Ct值与模板在1.08×102～1.08×108copies/μL范围内线性关系良好,扩增效率为106.4%;该方法仅检测BKoV时结果呈阳性,检测其他犊牛腹泻相关病原时结果呈阴性;能检出BKoV的最低检出限为10.8 copies/μL;批内和批间的变异系数均小于2%,重复性好。用该方法对311份采自河南、山东和四川省的犊牛腹泻样本进行检测,河南省BKoV的检出率为7.38%（20/271）,其他两省的样本均未检测出BKoV。本研究建立的方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BKoV的检测和流行病学调查提供了有力手段。

分类号： S852.65

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