出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与stx1/2B融合基因的构建和表达

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张雪寒

作者: 张雪寒;何孔旺;卢维彩;俞正玉;茅爱华;刘亚栋

作者机构:

关键词: EHECO157:H7;转位紧密素受体;志贺毒素;融合基因

期刊名称: 内蒙古农业科技

ISSN: 1007-0907

年卷期: 2009 年 03 期

页码: 65-67

摘要: 为了更好防治由出血性大肠杆菌O157:H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗具有很大优势。方法:构建表达tir和stxb的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stxB亚基基因72个氨基酸串联,构建pET28a-stx2b-Tir295-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达。结果:薄层扫描分析表明,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。结论:由于该融合蛋白由Tir、stx1b和stx2b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(stx)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。

分类号: Q78

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