猪囊尾蚴rTS-CC18蛋白的原核表达、纯化及其抗原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张少华

作者： 张少华;才学鹏;贾万忠;骆学农;刘红霞;赵松波;景志忠

作者机构：

关键词： 猪囊尾蚴;rTS-CC18抗原;原核表达;纯化;抗原性

期刊名称： 中国自然医学杂志

ISSN： 1008-7850

年卷期： 2009 年 03 期

页码： 161-164

摘要： 目的制备猪带绦虫囊尾蚴rTS-CC18抗原并对其抗原性进行鉴定,为建立猪囊尾蚴检测技术提供诊断抗原。方法用PCR方法从重组质粒pGEM-TS-CC18中扩增TS-CC18编码基因,构建pET30a-TS-CC18重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导筛选高表达量菌株。采用Ni-FF亲和层析方法提纯表达蛋白。Western blotting及间接ELISA检测重组蛋白的反应活性。结果Tricine-SDS-PAGE表明,重组菌经0.5 mmol/LIPTG诱导6 h,可稳定表达可溶性rTS-CC18蛋白,其相对分子质量约16×103。Western blotting检测诱导的蛋白能与猪囊尾蚴阳性血清发生特异性反应;间接ELISA检测血清抗体结果表明:纯化的rTS-CC18蛋白与全囊虫抗原的相对特异性达100.0%,相对敏感性达84.0%,总符合率为94.3%。结论成功制备了猪囊尾蚴rTS-CC18抗原,其特异性、敏感性及稳定性良好,对诊断猪囊尾蚴病及开发诊断制剂具有潜在应用价值。

分类号： S852.7

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