番木瓜环斑病毒西瓜株系衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 黄显德

作者： 黄显德;王玉;田延平;古勤生;李向东

作者机构：

关键词： 番木瓜环斑病毒西瓜株系;衣壳蛋白;原核表达;抗血清制备;检测

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2017 年 12 期

页码： 86-89

摘要： 以感染番木瓜环斑病毒西瓜株系(papaya ringspot virus-watermelon strain,PRSV-W)的西葫芦叶片为供试材料,通过RT-PCR克隆PRSV-W衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,并将其连接到原核表达载体pEHISTEV上得到重组质粒pEHISTEV-PRSV-W-CP。将其转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后可表达分子量约为37 kD的融合蛋白。将融合蛋白从凝胶中切下,乳化后免疫新西兰长耳兔,制备PRSV-W CP的抗血清。间接ELISA测定该血清效价为1∶8192。Western blot检测结果表明,该抗血清只与感染PRSV的西葫芦样品有特异性反应,而与健康西葫芦、感染西瓜花叶病毒的西葫芦及感染马铃薯Y病毒的普通烟样品均无反应。本研究为PRSV的快速检测以及CP蛋白功能的研究奠定了基础。

分类号： S432.41

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