文献类型： 中文期刊
第一作者： 刘肖峰
作者： 刘肖峰;陈松林;沙珍霞;吴娅红;于洋;王娜;修旺珊
作者机构：
关键词： 云纹石斑鱼;细胞系;核型;增强绿色荧光蛋白(EGFP)
期刊名称： 农业生物技术学报
ISSN： 1674-7968
年卷期： 2015 年 23 卷 10 期
页码： 1394-1400
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 鱼类细胞系在鱼类病毒学及功能基因组学方面发挥着重要作用。云纹石斑鱼(Epinephelus moara)是一种具有重要养殖价值的海水鱼类,尚未见细胞系建立的报道。本研究以云纹石斑鱼的心脏组织为材料,建立了云纹石斑鱼心脏细胞系(epinephelus moara heart cell line,EMH)。细胞系所用的培养基是在L15基本培养基中添加了HEPES(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid),抗生素,胎牛血清(fetal bovine serum,FBS),β-巯基乙醇(2-Mercaptoethanol,2-ME)和碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)的完全培养液。EMH细胞已传至20多代,由成纤维样细胞和上皮样细胞组成。本研究检测了温度及FBS浓度对EMH细胞生长的影响。EMH细胞在18~30℃能正常生长,其最适生长温度为30℃,在36℃时不能正常生长。FBS浓度在10%~20%细胞均能快速生长,最适FBS浓度为15%。染色体分析表明,具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为62%。用脂质体法将含增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的质粒载体p EGFP-N3转入EMH细胞后,EGFP成功表达。EMH细胞系的建立将为病毒的分离、鉴定和功能基因的研究奠定基础。
分类号： S917.4
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