陆地棉环核苷酸离子通道蛋白基因GhCNGC8克隆及初步表达分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 赵准
作者: 赵准;胡文冉;邵武奎;黄全生
作者机构:
关键词: 棉花;GhCNGC8;基因克隆;表达分析;载体构建
期刊名称: 西北农业学报
ISSN: 1004-1389
年卷期: 2024 年 33 卷 012 期
页码: 2306-2314
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为明确环核苷酸门控离子通道蛋白基因GhCNCG8对棉花抗逆方面的作用。利用棉花叶片克隆获得该基因,生物信息学方法分析其理化性质、结构和进化关系,利用qRT-PCR(实时荧光定量)方法分析基因在黄萎病菌、干旱、盐胁迫以及激素诱导下GhCNCG8表达模式和组织表达特异性;构建该基因VIGS沉默载体,利用农杆菌介导方法转化该基因到棉花叶片中,荧光定量PCR方法检测沉默效率。以棉花叶片cDNA为模板成功克隆GhCNGC8基因,该基因开放阅读框为2 247 bp,编码748个氨基酸。进化树分析结果表明,陆地棉GhCNGC8基因与拟南芥AtCNGC8基因关系较近,多序列结果比对显示,GhCNGC8蛋白结构符合CNGCs家族蛋白结构特征。qRT-PCR结果表明,该基因对黄萎病、干旱、盐处理等胁迫及茉莉酸(JA)、水杨酸(SA)和双氧水(H2O2)处理均有一定程度的响应,qRT-PCR分析结果表明,GhCNGC8基因在根、茎、叶、花、萼片和苞片中均有表达,叶中表达量最高。构建该基因的VIGS沉默载体转化棉花,qRT-PCR结果表明,该基因在棉花中已经沉默,表达量相比对照植株降低70%左右,表明GhCNGC8沉默载体构建成功并在棉花体内正常运行,GhCNGC8可能在棉花抗逆方面发挥重要作用。
分类号: S562
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