小鼠骨骼肌Desmin启动子的克隆及表达活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 薛超

作者： 薛超;安星兰;王春生;朴善花;苗向阳

作者机构：

关键词： 小鼠;Desmin基因;启动子;活性分析

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2011 年 07 期

页码： 17-20

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究在体细胞中小鼠Desmin基因启动子是否具有表达活性,试验根据NCBI中小鼠Desmin启动子的序列,利用生物软件Primer Premier 6.0设计序列上、下游引物,克隆小鼠基因组中Desmin启动子片段,将克隆到的Desmin启动子片段与pAcGFP1-N1载体中的CMV启动子进行置换以构建真核表达载体pAcGFP1-N1-Des,然后将pAcGFP1-N1-Des依次转染CHO-K1、COS-7、293GP和NIH-3T3等细胞后,观察绿色荧光蛋白表达活性。结果表明:克隆得到的Desmin基因上游启动子(841 bp)与NCBI序列(NT_039173.7)比对同源性为99.76%;克隆得到的启动子中含有CAAT-box、GC-box核心调控区以及MyoD等多种转录因子结合位点;所构建的pAcGFP1-N1-Des经转染COS-7、CHO-K1和Hela细胞后可观察到呈现表达活性的绿色荧光。说明克隆获得了在COS-7、CHO-K1以及Hela细胞中的具有表达活性的小鼠Desmin基因启动子。

分类号： Q78

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