微小毛霉凝乳酶的分泌表达、产物纯化及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王景会

作者： 王景会;李玉秋;郑丽;李倬琳;高岩;杨贞耐

作者机构：

关键词： 凝乳酶;分泌表达;毕赤酵母

期刊名称： 吉林农业大学学报

ISSN： 1000-5684

年卷期： 2011 年 33 卷 04 期

页码： 45-48+67

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用基因工程的方法对微小毛霉(Mucor pusillus)凝乳酶进行分子改造,获得适于乳品工业生产用的凝乳酶,克隆到了微小毛霉凝乳酶基因,构建了酵母表达质粒pPIC9K/M。线性化后电击转入毕赤酵母GS115,在甲醇诱导下进行凝乳酶的初步发酵试验,通过pH反应及酶抑制反应试验证明,重组凝乳酶获得了分泌表达。SDS-PAGE分析表明重组凝乳酶的分子量约为46 kD,与理论值(45.3 kD)基本相符,培养基上清液中凝乳酶的活性为311.8 U/mL,纯化的总回收率为51.89%,纯度达到92%。

分类号： TS252.1

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