鸭IFN-γ,IL-2 mRNA荧光定量RT-PCR方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张盼涛

作者： 张盼涛;曾显营;杨婧;李倩倩;田国彬;陈化兰

作者机构：

关键词： 荧光定量PCR;SYBR GreenⅠ;细胞因子;SEA;禽流感灭活疫苗

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2013 年 35 卷 06 期

页码： 472-476

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为评价疫苗免疫对鸭细胞免疫应答反应的影响,本研究提取鸭脾脏组织总RN A,采用鸭IFN-γ、IL-2、GAPDH基因特异性引物,建立了SYBR Green I荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法。结果显示IFN-γ、IL-2、GAPD H基因扩增标准曲线相关系数均高于0.99;3者扩增效率相近,均接近于100%;融解曲线呈特异性单峰;各基因组内和组间变异系数均小于2%。应用该方法检测不同佐剂禽流感灭活疫苗免疫樱桃谷鸭后脾脏组织IFN-γ和IL-2 mRNA的相对表达水平。结合免疫后抗体水平及攻毒保护结果,比较不同佐剂对禽流感灭活疫苗免疫应答的影响。结果显示,金黄色葡萄球菌毒素A重组蛋白(rSEA)佐剂组IFN-γ和IL-2 mRNA表达水平显著高于其他免疫组(p<0.05)。结果表明,建立的qRT-PCR特异性、重复性和稳定性良好,能够快速、准确检测鸭体内细胞因子的表达水平,为进一步评价疫苗免疫效果奠定了基础。

分类号： S858.32

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