西瓜SRAP-PCR反应程序的建立与体系的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李晓慧

作者： 李晓慧;王从彦;徐小利;常高正;张四普

作者机构：

关键词： 西瓜;SRAP;体系优化

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2008 年 23 卷 03 期

页码： 38-41

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以西瓜品种中华拳王为试材,探索了西瓜SRAP-PCR反应程序,并对西瓜SRAP-PCR反应体系的各影响因子进行了梯度设置试验,筛选和建立了可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP-PCR反应程序和体系。反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃退火1 min,72℃延伸1 min,共5个循环;94℃变性1 min,50℃退火1min,72℃延伸1 min,共35个循环;72℃延伸5 min;4℃保存。反应体系(Total为15μL):DNA 100 ng,Mg2+2.0 mmol/L,dNTPs 0.3 mmol/L,Primer 60 ng,Taqpolymerase 0.75 U。结果表明,该程序和体系能很好地满足西瓜基因组SRAP扩增的要求,SRAP标记应用于西瓜遗传研究是可行的。

分类号： S651

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